约惠春天——斑马鱼品系构建福利大放送

满纸科研苦，一把辛酸泪！都云作者痴，谁解其中味？

试剂抗体细胞价格不菲，品系构建、基因敲除、基因敲入、点突变太难，比价格，比方案，比交付数量……

每个科研人都曾为此抓耳挠腮，你的辛苦我们懂！

3月23日—4月30日，斑马鱼品系构建，低至1万元！

转基因品系构建、敲除品系构建、敲入品系构建、点突变品系构建……

科研人的“物美价廉”，强势来袭！

活动对象：科研院所及高校研究人员

活动时间：3月23日—4月30日

服务内容：转基因品系构建、敲除品系构建、敲入品系构建、点突变品系构建

活动内容

转基因品系构建

1万起：原价1.5万元起，现价每个品系1万元起

周期：6-7个月

7折：提供F1代成鱼，质粒构建费用7折

敲除品系构建

1.5万：原价2.5万元，现价每个品系1.5万元

周期：6-7个月

2种方式：提供2种剪切方式各2对F1代成鱼，免费与常用转基因品系交配

敲入品系构建

3.5万：原价4万元，现价每个品系3.5万元

周期：6-7个月

成鱼：提供F1代成鱼

点突变品系构建

5.5万：原价6.5万元，现价每个品系5.5万元

周期：10个月

成鱼：提供F1代成鱼

环特斑马鱼基因编辑服务

环特生物提供基于斑马鱼模型的基因编辑服务，利用CRISPR/Cas9技术快速在斑马鱼模型中验证人类遗传病、筛选致病基因、研究基因功能及作用通路等，主要研究领域为婴幼儿发育畸形、罕见病、神经系统疾病、心脑血管疾病、血液病、生殖缺陷等。

相较于哺乳动物基因编辑的试验周期长（一般1年以上）、表型不直观（一般需染色）、研究成功率低等缺点，斑马鱼基因编辑模型主要优势有：

1.实验周期快，最快可在2周内进行疾病相关的表型观察（F0代高效瞬时敲降），3个月内完成稳定品系构建（杂合子F1代3个月，纯合子F2代6个月，子代数量多）；

2. 直观、多维度地活体动态观察（可对特定器官组织细胞进行荧光标记，利用透明斑马鱼活体观察和成像，哺乳动物上很难实现)；

3. 研究成功率高（与哺乳动物相比较，斑马鱼基因编辑效率高，样本数量多，可同时测试多个相关基因，最大化保证研究的成功率）。

品系构建示例 

转基因品系构建

多代心手综合征谱系中的家族性心房心肌病携带2B棒状结构域的LMNA错义变异(p.R335W)

研究方法：斑马鱼转基因模型构建，心电图，心超，病理学检测等

研究结论：鉴定了一个携带LMNA p.R335W突变大的心手综合征谱系。综合电脑模拟、体外和体内验证的方法证明R335W变异对心房致病性的有效性。此外，我们推断老化和DNA修复功能障碍可能是心房病变的潜在机制。这项研究证实心房心肌病是核纤层蛋白病的早期表型，对这些患者应及早进行干预。

论文发表：Zhang Y, Lin Y, Zhang Y, Wang Y, Li Z, Zhu Y, Liu H, Ju W, Cui C, Chen M, Familial atrial myopathy in a large multi-generational heart-hand syndrome pedigree carrying LMNA missense variant in rod 2B domain (p.R335W), Heart Rhythm (2021)

基因敲除品系构建

TMEM201在血管系统和血管生成中的作用

研究方法：斑马鱼基因敲除模型构建，挽救实验等。

研究结论：TMEM201的N-末端与核骨架和细胞骨架复合物的接头相互作用，是调节内皮细胞迁移和血管生成所必需的。在Tmem201基因敲除小鼠过程中，视网膜血管发育受阻，主动脉环发芽缺陷。此外，tmem201的缺失损害了斑马鱼节间血管的发育。总之，TMEM201可以调节内皮细胞的迁移，控制血管生成的过程。

论文发表：Jia Li. Inner nuclear membrane protein TMEM201 maintains endothelial cell migration and angiogenesis by interacting with the LINC complex. Journal of Molecular Cell Biology，2023

基因敲入品系构建

klf6a-tagln2轴通过调节内皮细胞重排和肌动蛋白细胞骨架动力学来驱动斑马鱼血管修剪

研究方法：利用基因编辑技术制备klf6a/tagln2 mut和KI品系；三卡因0.06 mg/ mL处理至72 hpf；斑马鱼胚胎的延时实时成像；计算红细胞流动速度。

研究结论：发现斑马鱼胚胎尾静脉丛的腹侧毛细血管被修剪成大直径的尾静脉血管，klf6a-tagln2轴通过促进内皮细胞重排列和连接重构来调控血管修剪。

论文发表：Lin Wen, Tao Zhang, Jinxuan Wang, Xuepu Jin, Muhammad Abdul Rouf, Desha Luo, Yuan Zhu, Daoxi Lei, Hans Gregersen, Yeqi Wang, Guixue Wang. The blood flow-klf6a-tagln2 axis drives vessel pruning in zebrafish by regulating endothelial cell rearrangement and actin cytoskeleton dynamics，2021

点突变品系构建

tlx1点突变在胸腺发育中的功能

研究方法：研究发现并证实了海马基因单位点突变导致其脾脏缺失的假设，应用环特斑马鱼基因编辑技术进行了证实。为了证实这一假设，研究团队利用模式物种斑马鱼开展了3次基因编辑验证。

研究结论：结果表明，全基因tlx1敲除突变品系斑马鱼全部表现为先天性脾脏丢失；针对海马特异性位点的突变品系斑马鱼亦出现脾脏丢失；相邻位点的突变品系斑马鱼则有完整脾脏。实现了基因单个位点突变导致整个动物器官丢失的创新性研究，揭示了海马基因tlx1的特异性位点突变（tlx1A208T）调控其脾脏丢失的遗传机制。

论文发表：Yali Liu , Meng Qu, Han Jiang, Ralf Schneider, Geng Qin, Wei Luo, Haiyan Yu, Bo Zhang, Xin Wang, Yanhong Zhang, Huixian Zhang, Zhixin Zhang, Yongli Wu, Yingyi Zhang, Jianping Yin, Si Zhang, Byrappa Venkatesh, Olivia Roth, Axel Meyer, Qiang Lin. Immunogenetic losses co-occurred with seahorse male pregnancy and mutation in tlx1 accompanied functional asplenia. Nat Commun. 2022.

约惠春天，鱼售开启；

斑马鱼品系构建钜惠价，助力科研，速来集结！

3月23日—4月30日，环特生物的宠爱如期而至，福利大派送，你的小鱼在等你，快来开启你的灿烂春天吧！

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